【Application Note】MMSを⽤いた、様々なpH および濃度のタンパク質ライブラリーの構造の評価と温度ストレスの⽐較

熱ストレスは、タンパク質の安定性を測定するために利⽤される最も⼀般的なストレス条件です。しかしながら、UV 融解、円⼆⾊性(CD)、⽰差⾛査熱量測定(DSC) などの熱ストレスの影響を測定する技術は、典型的には全体的な融解温度Tm と熱⼒学的パラメーターを提供するだけで、融解に関連する構造変化に関する粒度は⾮常に低いです。

マイクロ流体変調分光法 (MMS) は、⾃動化された中⾚外分光法であり、幅広い濃度範囲やバッファー条件において、タンパク質の⼆次構造を⾮常に⾼い分解能で測定することができます。MMSを搭載したAurora TXは、タンパク質のアンフォールディング、そして熱による凝集をもたらす構造変化の測定とモニタリングに使⽤することができます。

この研究でRedShift は、まずリゾチームの熱によるアンフォールディングを様々なpH 値の範囲にわたって測定し、Tm がpH に依存することを⾒出しました。次に、様々な濃度のIgG を融解し、Tm が濃度にほとんど依存しないことを⾒出しました。最後に、MMS を⽤いて卵⽩アルブミンについて決定された2 つのTm 値における構造の違いを特定しました。

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