解糖系は、哺乳類細胞の2つの主要なエネルギー産⽣経路のうちの1つです。解糖の間、グルコースはピルビン酸塩を経て最終的に乳酸塩へと分解され、⽣理学的なpHにおける2つのH+の放出と細胞を囲む細胞外培地の酸性化をもたらします。
Agilent Seahorse XF アナライザーは、⽣きた細胞で酸素消費速度 (OCR; Oxgen Consumption Rate) と細胞外酸性化速度 (ECAR; Extracellular Acidification Rate) の同時かつリアルタイムな計測を⾏います。
OCR計測は、細胞の呼吸に直接に関連があります (ミトコンドリア阻害剤の添加によりミトコンドリアによらない酸素消費の寄与を取り除いた後のもの)。しかしながら、解糖活性とのECARの強⼒な相関性にも関わらず、その他の酸性化の原因 (主にミトコンドリア由来のCO2)は、計測の特異性を制限する可能性があります。さらに、培地の緩衝能と計測システムもECAR値に著しく影響を与えます。これらの要素を説明する能⼒は、解糖のより正確で特異的な計測を可能にします。
Agilent Seahorse XF Glycolytic Rate アッセイは、細胞外酸性化へのCO2の寄与を説明するためにECAR・OCR計測を利⽤し、Glycolytic Proton Efflux Rate (glycoPER) を算出します。この計測基準は、解糖の間にプロトンが細胞外の培地に排出される速度で、解糖の間に産⽣される乳酸塩の量に等しいものです。この⽂書では、22の⼀般的な細胞モデルについて取得された基準値と、XF Glycolytic Rate アッセイのレビューをご紹介します。
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