【Application Note】神経前駆細胞からの初期ニューロン分化過程における細胞遷移を同定する XFを⽤いた代謝のフェノタイピング

Agilent_StemCell_AppNote_J_fig_sIn vitro 幹細胞分化系は、細胞分化を制御する必須因⼦の検証と完全に機能的な細胞の創出を可能にします。⼈⼯多能性幹細胞 (iPSCs) のような多能性細胞からの機能的な細胞の創出は、細胞の代謝におけるダイナミックな変化を伴います。これらの代謝の変化は、分化と成熟への細胞コミットメントの最初のステップから連続的に起こります。したがって、これらのプロセスを通した細胞
の代謝の時間依存的な⽣細胞解析が必要です。

 

Agilent Seahorse XF テクノロジーは、細胞代謝の表現型の変化を観察するために、連続的および定量的な解析プラットホームを提供することができます。このApplication Noteは、コミットした神経前駆体/幹細胞 (NPCs) から未熟NPCsまでの、侵害受容器感覚ニューロンの初期分化過程の代謝解析について詳細に述べています。XF解析のための細胞準備プロトコル、Ara-C処理による⾼増殖性細胞のネガティブセレクション、ゲノムDNAによるデータ・ノーマライゼーションについて含んでいます。得られたデータは、よりダイナミックな変化を⽰したミトコンドリア呼吸とは対照的に、コミットメント・ステージの後に続くNPCsにおける解糖の持続的な下⽅制御を明らかにしました。このアプリケーション・モデルは、最終分化ニューロンまでの成熟を通した⻑期の分化過程の解析に拡張できます。また、他の幹細胞の時間依存的な代謝の変化に関する研究、とりわけ代謝の振動のような細胞のダイナミクスの評価へ適合させることができます。

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